例2.
猪→人异种器官移植的主要屏障是超急性排斥反应(HAR),α1,3半乳糖(α1,3Gal)是引起HAR的主要抗原。将清除了α1,3Gal的猪器官移植给狒狒,仍会发生排斥反应,提示在猪体内还存在其他异种抗原。我们前期研究发现CMAH和B4GALNT2基因与异种移植免疫排斥相关,它们分别参与异种抗原NeuGc和Sda的合成。本项目拟以版纳微型猪近交系为研究对象,采用WB和IHC分析CMAH和B4GALNT2的蛋白表达谱和细胞定位,HPLC检测干扰和过表达CMAH和B4GALNT2基因后NeuGc和Sda抗原含量的变化,LDH-ELISA检测NeuGc和Sda抗原对人血清介导的细胞毒性,FACS检测NeuGc和Sda抗原结合的人血清免疫球蛋白的种类和含量,最终确定CMAH和B4GALNT2能否催化相应抗原的合成,鉴定其在猪→人异种器官移植排斥中的功能,为建立适用于异种器官移植的猪模型奠定基础。
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