동시배양법을 통한 신경전구체의 새로운 분화과정 탐색
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Neural stem cell,분화완료 된 신경세포를 각각 단독배양 했을 때와 동시배양 했을 때 분화과정의 차이점을 규명하고,새로운 분화 marker와 분화유도 가능 인자를 탐색
1.Neural stem cell,분화완료 된 신경세포를 각각 단독배양 했을 때와 동시배양 했을 때 분화과정의 차이점 규명-Stem cell을 단독배양 했을 때와 동시배양 했을 때 분화과정의 차이점 규명 2.분화유도인자들과 protein-A의 관계 탐색:분화과정 marker로써의 beta-Protein-A-Stem cell,분화완료 된 신경세포를 각각 단독배양 했을 때와 동시배양 했을 때 Protein-A의 발현 양상 확인-bFGF만으로 유도된 분화하는 세포의 최종 cell type 확인지금까지 알려져 있던 기존의 분화 유도 인자들과 protein-A는 어떤 관계가 있는지 탐색해 봄으로써,protein-A가 특이적 분화 과정의 marker로써 분류가 가능한지 탐색.3.지금까지 분화 유도인자로 알려져 있는 단백질들을 동시배양한 세포에 처리해 봄으로써 기존의 결과들과 mechanism상의 차이점 탐색-단독배양과 동시배양 각각의 조건에서 지금까지 알려진 bFGF,EGF,poly-O-lysine등의 분화유도인자를 처리 후 Protein-A의 발현양상 확인 및 mechanism 탐색실험의 목적:기존의 단독배양된 stem cell 실험에서의 결과들과 동시배양 후 결과들이 다를 경우 치료제로써의 적용에 있어서 지금까지 알려지지 않은 기작으로,또는 잘못 이해된 기작 반응 등으로 야기될 수 있는 부작용을 예측할 수 있을 것이며,또한 세포들간의 새로운 기작을 탐색4.동시배양된 세포를 이용한 2-D gel analysis 실시:분화와 관련된 새로운 인자 탐색가능-단독배양과 동시배양 조건에서 cell lysate을 분리하여 2-D gel 분석-단독배양과 동시배양 조건에서 secreted 단백질을 체취하여 2-D gel 분석5.새롭게 발굴된 분화관련인자들의 역할 탐색-발굴된 단백질들의 분화과정에서의 역할 탐색:분화 marker 가능성 탐색-Secreted 단백질을 이용한 2-D gel 결과를 토대로 변화 있는 단백질들의 분화유도인자로써의 가능성 탐색
분화과정을 탐색함에 있어서 지금까지 이루어져 왔던 단독배양법을 이용한 분화과정을 탐색하는 것이 아니라,인체(생체)의 환경이 조금 더 가깝다고 사료되는 두 가지 이상의 세포를 동시배양 후 분화과정 및 분화관련 인자를 탐색함으로써 지금까지 알려져 왔던 사실들의 정확성을 재발견함과 동시에 잘못 이해되고 있는 부분들에 대한 조사도 가능하다.또한 줄기세포를 치료에 적용함에 있어서 야기될 수 있는 부작용을 좀 더 구체적으로 예측할 수 있을 것으로 사료됨.또한 동시배양법은 다른 질병연구에도 적용이 가능함으로 많은 생명체 연구에 있어서 잘못 이해된 결과로 야기될 수 있는 지출을 줄일 수 있을 것으로 사료됨.