Dehydrozaluzanin C (DC) is a sesquiterpene lactone isolated from Asteraceae plant Ainsliaea macrocephala. To investigate the antitumor effects of DC and possible molecular mechanisms for treating cancer. The antitumor effect of DC was studied using HT-29 and HCT-116 human colon tumor cell lines and Balb/c nude mice models. The anti-proliferative, proapoptotic effects, and cycle arrest of DC were observed by cell viability, colony formation, apoptosis, and cycle assays. The changes of protein expression level were examined by Western blot analysis. The transcription activity of PPAR gamma was determined by Luciferase reporter assay. The role of PPAR gamma activation in the antitumor activity of DC was verified using PPAR gamma antagonist GW9662 and si-PPAR gamma HT-29 cells. DC treatment significantly decreased colon tumor cell viability, cell clone number, and increased apoptosis rate and arrested cell cycle at S phase. Furthermore, DC treatment significantly decreased Bcl-2, CDK2, and cyclin A2 protein levels while increasing the expression of cleaved caspase 3 and Bax in HT-29 and HCT-116 cells. Further investigations indicated that cell survival, induction of apoptosis, and cycle arrest by DC could be significantly reversed following treatment with the PPAR gamma antagonist GW9662 or in si-PPAR gamma cells. In vivo, DC treatment significantly decreased the weight and volume of xenograft tumor tissues in mice and apoptosis-related protein levels. The results suggest that DC effectively inhibits colon tumor cell proliferation, clone formation, apoptosis, and cell cycle arrest through PPAR gamma activation. These results support the potential of DC as an anti-tumor lead compound for further investigation.

Calcium ions (Ca2+) play a vital role in many biological processes. Transmembrane and coiled-coil domain 1 (TMCO1) has been characterized as an endoplasmic reticulum (ER) transmembrane protein in recent years. It keeps the cytoplasm and ER's Ca2+ homeostasis stable by acting as a novel calcium channel. Studies from different laboratories have revealed that the mutation or deficiency of TMCO1 is closely correlated with several diseases, including cerebro-facio-thoracic dysplasia (CFTD), glaucoma, premature ovarian failure (POF), osteoporosis, and cancer. Here, we review the characteristics of TMCO1 and its involvement in related diseases, which may provide useful information for developing therapeutic strategies for these diseases, as well as promote further research on this protein.

Cytochrome P450 1A1 (CYP1A1), a heme-containing monooxygenase, is of particular importance for human health because of its vital roles in the metabolic activation of pro-carcinogenic compounds to the carcinogens. Deciphering the relevance of CYP1A1 to human diseases and screening of CYP1A1 modulators require reliable tool(s) for probing this key enzyme in complex biological matrices. Herein, a practical and ultrasensitive fluorescence-based assay for real-time sensing CYP1A1 activities in biological systems has been developed, via designing an isoform-specific fluorogenic sensor for CYP1A1 (CHPO). The newly developed fluorogenic substrate for CYP1A1 has been carefully investigated in terms of specificity, sensitivity, precision, quantitative linear range and the anti-interference ability. The excellent selectivity, strong anti-interference ability and fast response kinetics, making the practicability of CHPObased CYP1A1 activity assay is better than that of most reported CYP1A1 activity assays. Furthermore, CHPO has been successfully used for imaging CYP1A1 activities in living cells and human tissues, as well as for high-throughput screening of CYP1A1 inhibitors using tissue preparations as enzyme sources. Collectively, this study provided a practical fluorogenic sensor for real-time sensing CYP1A1 in complex biological systems, which would strongly facilitate the investigations on the relevance of CYP1A1 to human diseases and promote high-throughput screening of CYP1A1 modulators for biomedical applications. (C) 2020 Chinese Chemical Society and Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences. Published by Elsevier B.V. All rights reserved.

目的:探究三叶苷（trilobatin,TLB）对小鼠急性肝损伤的保护作用及其促进人正常肝细胞L-02的增殖作用。方法:1.通过简单随机法将SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为7组:空白对照组（Control）、空白+TLB高剂量组（Control+40 mg/kg）、模型组[D-氨基半乳糖（D-galactosamine,D-Gal N）/脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）]、模型+TLB低剂量组（D-Gal N/LPS+10 mg/kg）、模型+TLB中剂量组（D-Gal N/LPS+20 mg/kg）、模型+TLB高剂量组（D-Gal N/LPS+40 mg/kg）、模型+阳性对照组（联苯双酯）（D-Gal N/LPS+Bifendate）。给药组分别给予小鼠相应浓度的TLB或联苯双酯,空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水进行预防性给药7天,每天2次。然后采用腹腔注射D-Gal N（700 mg/kg）/LPS（100μg/kg）制备急性肝损伤模型,造模5 h后取材。通过苏木精-伊红染色观察小鼠肝脏病理变化情况;酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）检测血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）水平和炎症相关因子白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、内皮素-1（endothelin-1,ET-1）、IL-4和IL-10的含量,以及活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）的活力。2.将人正常肝细胞L-02经不同浓度的TLB处理后,通过噻唑蓝比色法测定TLB作用L-02细胞的安全浓度范围以及对L-02细胞活力的影响;采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷酶（5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U）ELISA法和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EDU）荧光染色法分别观察L-02细胞DNA的含量和细胞增殖的改变;通过免疫印迹法分析细胞周期相关蛋白肝细胞核因子4α（hepatocyte nuclear factor 4α,HNF4α）、周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinases 4,CDK4）、cyclin D1以及相关调节蛋白肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、酪氨酸激酶（tyrosine kinase,c-Met）、蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）和细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase 1/2,Erk1/2）的蛋白表达。结果:1.D-Gal N/LPS模型组较空白对照组小鼠肝脏组织外观呈暗红色、充血肿大,肝细胞坏死,且出现明显出血、病变和炎症细胞浸润;血清中ALT、AST的水平明显升高;IL-1β、IL-6、TNF-α、ET-1、ROS和MDA的含量均明显增加,IL-4、IL-10的含量和SOD、GSH-Px的活力明显降低。而TLB（10、20、40 mg/kg）预给药组和D-Gal N/LPS+Bifendate组小鼠肝脏外观和颜色明显改善;血清中ALT、AST的水平明显降低;IL-1β、IL-6、TNF-α、ET-1、ROS和MDA的含量显著降低,而IL-4、IL-10的含量和SOD、GSH-Px的活力明显增加。2.与对照组比较,TLB（25、50、100μM）作用L-02细胞72 h能够明显增加L-02的细胞活力,并明显增加Brd U含量及EDU的荧光强度;同时,TLB能够明显下调L-02细胞中HNF4α的蛋白表达,上调CDK4、cyclin D1、HGF的蛋白表达,并增加c-Met的磷酸化水平和其下游Akt、Erk1/2的磷酸化水平。结论:TLB能够通过降低转氨酶水平,减少炎症因子的产生和氧化应激明显改善D-Gal N/LPS诱导的小鼠急性肝损伤;同时,TLB对人正常肝细胞L-02具有促增殖作用,其机制可能与调控HGF/c-Met信号途径有关。

Dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV), an important prolyl-specific peptidase in the serine hydrolase family, hydrolyzes a large number of endogenous oligopeptides. In clinical studies, the detection of DPP-IV, especially the detection of its activity, is particularly important. We previously reported a specific fluorescent two-photon probe for DPP-IV. In this study, to further verify that our probe can be used for DPP-IV activity detection, we developed an accurate and sensitive method for the determination of DPP-IV activity in human tissue microsomes, cell homogenates or cell supernatants by liquid chromatography-fluorescence detection (LC-FD). This method is based on the fluorescence generated from BAN obtained from the hydrolysis of GP-BAN by detecting DPP-IV. The linearity, sensitivity, recovery, precision and stability of the method were fully validated. The method based on LC-FD has a lower limit of quantitation for BAN (product of DPP-IV), as low as 5 nM (only needs 2 μL), which is much lower than that of the others. This method also demonstrated good accuracy and precision; variances of both were less than 15% between the intra-and inter-assay. In addition, the method was successfully applied to the determination of DPP-IV activity in various cell homogenates and cell supernatants. The development of the LC-FD method will help to understand the expression and function of DPP-IV in different biological samples in humans for future studies. © The Royal Society of Chemistry 2020.

目的:药物肾毒性的传统评价方法多采用体内动物模型,通过观察短期或长期给药后动物血清、尿液中尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）等生物标志物以及试验终点肾脏病理组织形态学的改变来评价药物肾毒性,并推断药物对人体的可能毒性,该方法耗时、耗资、耗力,且反应指标不敏感。而体外2D肾细胞系模型不能准确反应药物在体内生理环境中的毒性作用。现代药物毒理学研究开始由体内研究向体内和体外研究相结合发展,建立高通量肾毒性体外评价模型可以提高目标化合物的筛选效率,最新研究表明人诱导多能干细胞在适宜的体外条件下可分化再生形成三维的球状类器官（Organoid）结构,其生理功能与肾类似。本研究基于肾3D类器官构建一种新颖的评价药物肾毒性的方法,并将其应用于中药单体商陆皂苷甲的肾毒性评价。方法:首先向铺满基质胶的培养皿中接种人诱导多能干细胞,待细胞达到40～50%汇合度时,去除无饲养层培养基,加入含细胞因子的基础培养基,进行单细胞培养分化,收集细胞置于Transwell培养装置中,制作肾类器官,并对其进行形态观察及验证,确保其生长状态良好。其次,使用阳性化合物（顺铂、庆大霉素）对3D类器官模型进行验证,具体包括给药后3D类器官形态的变化。最后利用该模型对中药单体商陆皂苷甲进行肾毒性评价。结果:通过显微观察可以看到转入Transwell 3D培养后类器官的雏形从开始的细胞团,逐渐分化出管状结构,且随着时间推移,管状结构越清晰,未分化细胞即阴影部分越来越少。在高倍镜下观察类器官边缘部分,可见其明显出现多个高折光的管状结构轮廓,特异性表达蛋白验证肾类器官。当培养基中分别加入不同浓度的顺铂、庆大霉素时,随着药物浓度增加,肾类器官形态破坏的程度和数量明显增加。通过高内涵染色观察,在给与不同浓度的商陆皂苷甲后,肾3D类器官中凋亡细胞的数量及肾损伤因子（KIM-1）蛋白表达明显增加,活细胞数量明显减少。同时培养基中BUN含量与阴性对照相比明显升高,呈量效及时效关系。结论:本研究成功构建了基于3D类器官的肾毒性评价方法,并将其应用于中药单体商陆皂苷甲的肾毒性评价,其具体的损伤机制还有待进一步深入研究。基于3D类器官进行药物肾毒性评价不仅可减少受试物用量,利于早期对化合物潜在肾毒性进行深入评价,更能快速反应药物对肾脏毒性作用的具体部位,而且可在短期内完成对目标化合物肾毒性机制研究,缩短研究周期,减少实验动物的使用。

目的:探究三叶苷（TLB）对KK-Ay 2型糖尿病（T2DM）模式小鼠的降血糖作用及其可能的作用机制。方法:将8周龄雄性KK-Ay小鼠随机分为4组:模型组（KK-Ay）、模型+TLB 10mg/kg组（KK-Ay+TLB-10）、模型+TLB 20 mg/kg组（KK-Ay+TLB-20）、模型+Met150 mg/kg组（KK-Ay+Met）。将7周龄雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为:空白组（WT）、空白+TLB 20 mg/kg组（WT+TLB-20）。KK-Ay组和WT组小鼠灌胃等体积生理盐水（NS）,其余4组小鼠根据分组情况灌胃不同剂量的TLB或Met,每日2次,连续28周。实验过程中KK-Ay小鼠给予高脂高糖饲料喂养,C57小鼠给予普通饲料喂养。每周测1次空腹血糖（FBG）,第20周进行口服糖耐量实验（OGTT）,21周进行胰岛素耐量实验（ITT）,给药结束次日取材收集血液样本、胰腺及肝组织。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测脂代谢相关指标:甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、游离脂肪酸（FFA）,氧化应激相关指标:活性氧（ROS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）以及空腹胰岛素（FINS）;根据FINS和FBG计算稳定模型评估胰岛素抵抗（HOMA-IR）值。采用苏木素伊红（H＆E）染色观察小鼠胰腺组织的形态学改变。免疫组织化学（IHC）法检测小鼠胰岛中INS含量。蛋白质印迹（WB）法检测小鼠胰腺组织中Kelch样ECH关联蛋白1（keap-1）、核因子E2相关因子2（Nrf-2）、血红素加氧酶1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO-1）、胰岛素受体（IR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、葡萄糖转运蛋白2（GLUT-2）的蛋白表达及肝脏组织中GLUT-2的蛋白表达;p-IR（Tyr1185）、p-IRS-1（Ser 307）、p-Akt（Tyr 312+Tyr 315+Tyr 316）、p-GSK-3β（Ser 9,Tyr 216+Tyr 279）的蛋白水平。结果:KK-Ay组小鼠的FBG较WT组小鼠均显著升高,而KK-Ay+TLB-20组小鼠的FBG较KK-Ay组小鼠的FBG显著下降;在给予葡萄糖后的0、30、60、90、120min时间点,KK-Ay组小鼠的血糖值均明显高于WT组小鼠,而KK-Ay+TLB-20组小鼠以上5个时间点的血糖值与血糖曲线下面积较KK-Ay组小鼠均显著下降;在给予胰岛素后的0、30、60、90、120 min时间点,KK-Ay组小鼠的血糖值均明显高于WT组小鼠,而KK-Ay+TLB-20组小鼠在注射后0、60、90、120 min的血糖值与血糖曲线下面积较KK-Ay组小鼠均显著下降;KK-Ay组小鼠的HOMA-IR值明显高于WT组小鼠,而KK-Ay+TLB-10、KK-Ay+TLB-20组小鼠的HOMA-IR值较KK-Ay组小鼠均显著降低;WT组小鼠的胰岛形态饱满完整,呈圆形或椭圆形,岛内细胞数量丰富且致密,KK-Ay组小鼠的胰岛体积明显缩小,形态不均匀,岛内细胞数明显减少,而TLB能不同程度地改善KK-Ay小鼠胰岛的病理性改变;KK-Ay组小鼠INS的IOD值明显低于WT组小鼠,而KK-Ay+TLB-10、KK-Ay+TLB-20组小鼠较KK-Ay组小鼠INS的IOD值均显著升高;KK-Ay组小鼠较WT组小鼠血清中CAT、GSH-Px、SOD的活力及HDL-C水平明显降低,ROS、TG、LDL-C、FFA水平明显升高;而TLB能够显著升高KK-Ay组小鼠CAT、GSH-Px和SOD的活力及HDL-C水平并降低ROS、TG、LDL-C、FFA水平;KK-Ay组小鼠较WT组小鼠胰腺组织中keap-1、胞核Nrf-2的蛋白表达及p-GSK-3β（Tyr 216+Tyr 279）、p-IRS-1（Ser 307）的磷酸化水平均显著升高,胞浆Nrf-2、HO-1、NQO-1、GLUT-2的蛋白表达及p-GSK-3β（Ser9）、p-Akt（Tyr 312+Tyr 315+Tyr 316）、p-IR（Tyr 1185）的磷酸化水平、肝组织中GLUT-2的蛋白表达均明显降低;而KK-Ay+TLB-20组小鼠较KK-Ay组小鼠胰腺组织中keap-1、胞浆Nrf-2的蛋白表达及p-GSK-3β（Tyr 216+Tyr 279）、p-IRS-1（Ser 307）的磷酸化水平均明显降低,胰腺组织中胞核Nrf-2、HO-1、NQO-1、GLUT-2的蛋白表达及p-GSK-3β（Ser 9）、p-Akt（Tyr 312+Tyr 315+Tyr 316）的磷酸化水平和肝组织中GLUT-2的蛋白表达均明显升高。结论:TLB能够显著降低KK-Ay小鼠的血糖,改善其胰岛素抵抗及脂代谢紊乱,其作用机制可能与调控Nrf-2/ARE和IRS-1/GLUT-2信号途径有关。

目的:研究淫羊蕾次苷Ⅱ（ICS Ⅱ）对脑缺血再灌注损伤（CIRI）后神经炎症的抑制作用及其作用机制。方法:采用大脑中动脉栓塞法建立小鼠局灶性CIRI模型,造模前后小鼠的脑血流（CBF）用组织血流血氧实时成像系统监测;将C57BL/6雄性小鼠采用简单随机法分为假手术组（sham）、假手术+ICS Ⅱ高剂量组（sham+ICS Ⅱ 24 mg/kg）、模型组（model）、模型+ICS Ⅱ低剂量组（model+ICS Ⅱ 6 mg/kg）、模型+ICS Ⅱ中剂量组（model+ICS Ⅱ 12 mg/kg）、模型+ICS Ⅱ高剂量组（model+ICS Ⅱ 24 mg/kg）,共为6个实验组。造模后,给药组分别灌胃低、中、高剂量的ICS Ⅱ（2次/天）进行治疗,连续3 d。假手术组和模型组给予同体积的生理盐水。治疗3 d后,小鼠神经功能的改变采用改良Longa 5分法考察;小鼠脑梗死体积的变化采用2,3,5-三苯基四唑氯化物（TTC）染色法检测;小鼠运动感觉功能采用转棒实验和粘附移除实验观察;小鼠学习记忆功能采用Y迷宫实验观察;小鼠脑缺血半暗带（CIP）中促炎因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（i NOS）和抗炎因子白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）的水平采用ELISA法检测;小鼠脑中炎症通路相关蛋白的表达情况采用免疫印迹法（WB）检测;小鼠脑中小胶质细胞特异性蛋白抗体（IBA-1）和神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达情况采用免疫荧光染色法检测。结果:造模3天后,模型组的神经功能缺陷评分与假手术组相比明显提高,而与模型组比较,ICS Ⅱ低、中、高剂量治疗组小鼠神经学功能缺陷评分明显下降,其中,ICS Ⅱ中、高剂量组较模型组小鼠的运动感觉功能和学习记忆功能显著改善。与假手术组比较,模型组小鼠脑梗死体积显著增加,而ICS Ⅱ治疗组较模型组小鼠脑梗死体积明显减少。模型组较假手术组小鼠脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、i NOS的含量显著升高,IL-4和IL-10水平显著下降,而ICS Ⅱ治疗后能够明显降低TNF-α、IL-1β、IL-6、i NOS的水平,明显增加IL-4和IL-10的含量;同时,ICS Ⅱ能够明显减少星型胶质细胞和小胶质细胞的活化数量。此外,ICS Ⅱ治疗组较模型组小鼠脑组织内过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）和PPARγ的蛋白表达明显增加,但对PPARβ的蛋白表达无影响。不仅如此,与模型组比较,ICS Ⅱ能够明显下调小鼠术后脑组织内Toll样受体/核因子-κBp65和NF-κBp50、IκB激酶（IKK）β、IKKα蛋白的磷酸化水平且上调NF-κB的抑制蛋白（IκB）的蛋白表达。结论:ICS Ⅱ具有抑制CIRI小鼠神经炎症作用,其作用与调控PPARα/γ信号途径,进而增加抗炎因子的释放并降低促炎因子的水平有关。

目的:研究三叶苷（TLB）对小鼠脑微血管内皮细胞b End.3的促增殖作用及其对大脑中动脉栓塞（MCAO）诱导的脑缺血再灌注损伤（CI/RI）大鼠血管新生的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:1.TLB促b End.3细胞增殖作用的实验研究:MTT法筛选TLB对b End.3细胞的安全浓度范围以及最佳作用时间;TLB处理b End.3细胞72 h后,EDU荧光染色和Brd U ELISA法检测细胞增殖情况;光学显微镜观察TLB对b End.3细胞形态的影响;流式细胞术分析b End.3细胞周期;western blot法检测细胞周期相关蛋白（cyclin D1、CDK4）表达、Sir2家族成员SIRT1-7的蛋白表达、血管内皮生长因子VEGFA的蛋白表达;分子对接和表面等离子体共振（SPR）全自动仪分析TLB和SIRT7的结合情况。2.TLB对脑缺血再灌注损伤大鼠血管新生作用的实验研究:雄性SD大鼠（体重200-220 g）于SPF级动物房适应性饲养1周,采用MCAO法制备CI/RI大鼠模型,缺血2 h后拔出拴线进行再灌注。简单随机法将大鼠随机分为4组:假手术组（sham）、假手术+给药组（sham+TLB 20 mg/kg）、模型组（MCAO）以及模型组+给药组（MCAO+TLB 20 mg/kg）。Sham+TLB 20 mg/kg和MCAO+TLB 20 mg/kg分别按体重给予相应体积的TLB 20 mg/kg;sham和MCAO组分别按体重给予等体积生理盐水,每天2次,分别灌胃1、3、7、14、28天。激光多普勒血流仪监测缺血前、缺血时和缺血后造模过程中大鼠的脑血流（CBF）变化;Longa 5分法对大鼠神经功能损伤程度进行评分;免疫荧光法检测血管标志物PECAM-1（CD31）、新生血管标志物Brd U和功能性血管标记物番茄凝集素（tomato lectin）的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大脑缺血半暗带中血管内皮生长因子VEGFA和VEGFR-2的含量;western blot法检测大脑缺血半暗带中蛋白SIRT7的表达。结果:1.TLB促b End.3细胞增殖作用:TLB能够浓度依赖性地促进b End.3细胞增殖并增加S期的细胞比例;TLB不仅能够增加周期相关蛋白cyclin D1和CDK4的表达,还可增加Sir2家族中SIRT6和SIRT7的蛋白表达;此外,TLB能够上调VEGFA的蛋白表达。值得注意的是,通过分子对接和SPR技术分析TLB与SIRT7的亲和力的研究结果显示TLB能够与SIRT7直接结合。2.TLB促CI/RI大鼠血管新生的作用:脑血流监测结果显示,MCAO后大鼠脑血流降至造模前基础血流值的20%以下,缺血2 h行再灌注后,脑血流恢复至基础血流值的80%,提示MCAO诱导的CI/RI模型制备成功;MCAO组大鼠较sham组大鼠神经功能评分明显升高,而MCAO+TLB 20 mg/kg组大鼠给药3、7、14、28天后较MCAO组大鼠神经功能评分明显降低;但是,1天时间点MCAO+TLB 20 mg/kg组较MCAO组的大鼠神经功能评分无差异;MCAO组大鼠较sham组大鼠脑缺血半暗带中新生血管和功能性血管数量明显降低;而MCAO+TLB 20 mg/kg组较MCAO组脑缺血半暗带中新生血管和功能性血管数量明显增加;MCAO组大鼠较sham组在1、3、7、14、28天时间点大鼠脑缺血半暗带中促血管新生因子VEGFA及其受体VEGFR-2的含量明显降低;而MCAO+TLB 20 mg/kg组大鼠在3、7、14、28天时间点较MCAO大鼠脑内VEGFA及其受体VEGFR-2的水平显著增加;此外,MCAO组大鼠较sham组在28天时间点大鼠脑内SIRT7蛋白表达明显下调,而MCAO+TLB 20 mg/kg组大鼠较MCAO大鼠脑内SIRT7蛋白表达明显上调。结论:TLB能够浓度依赖性的促进b End.3细胞增殖并能改善CI/RI大鼠神经功能,其机制可能与调控SIRT7/VEGFA信号通路从而促进脑血管新生有关。

摘要： 目的 基于药代动力学研究山豆根对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型的抗炎作用及机制。方法 雄性SD大鼠分为空白对照组、氢化可的松组(40 mg·kg^-1 )、山豆根水提浸膏粉高剂量组(生药0. 6 g·kg^-1 )和低剂量组(生药0. 3 g·kg^-1 )，测定致炎前和致炎后0. 5、1、2、和3 h足跖肿胀度、致炎组织中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量及血中苦参碱、氧化苦参碱药代动力学参数。结果 氢化可的松组致炎后肿胀率明显降低（P <0. 01），山豆根水提浸膏粉组致炎后肿胀率亦降低（P <0. 05）且体内苦参碱含量呈剂量依赖性，高剂量组AUC值约为低剂量组两倍，达峰时间与抗炎作用高峰时间一致;山豆根水提浸膏粉可显著下调炎症因子含量（P <0. 01），抑制其表达的作用呈剂量依赖性。结论 山豆根对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型具有抗炎作用，且呈剂量依赖性，与体内苦参碱系统暴露量成正相关，抗炎机制与抑制炎症因子表达有关。